Capitolul 1 - DISPOZIŢII GENERALE - Protocol din 14-mai-1962 LA ACORDUL EUROPEAN privind schimbul de reactivi de determinare a grupelor sanguine

Acte UE

Editia Speciala a Jurnalului Oficial 0

În vigoare

Versiune de la: 1 Ianuarie 2007

CAPITOLUL 1:DISPOZIŢII GENERALE

1.Particularităţi

Un reactiv pentru determinarea grupelor sanguine trebuie să reacţioneze cu toate probele de sânge examinate care conţin antigenul omolog al anticorpului sau al celorlalte substanţe menţionate pe etichetă.

Când un reactiv este utilizat conform tehnicii recomandate de producător, nici unul dintre factorii sau fenomenele următoare nu trebuie să apară:

a)proprietăţi hemolitice;

b)anticorpi sau substanţe diferite de cele menţionate pe etichetă;

c)produse bacteriene care ar putea da naştere unor reacţii false, pozitive sau negative;

d)pseudo-aglutinare prin formarea de rulouri;

e)fenomenul de inhibiţie.

2.Potenţa

Titrul se determină prin diluţii duble succesive ale reactivului examinat într-un mediu corespunzător. La fiecare diluţie se adaugă un volum egal dintr-o suspensie de globule roşii.

Titrul este reciproca cifrei care reprezintă cea mai puternică diluţie în care se poate observa o reacţie vizibilă, diluţia fiind calculată fără a include în volumul total volumul suspensiei globulare.

În cazul anti-A şi anti-B şi al altor reactivi destinaţi să fie utilizaţi pe lame, aviditatea este exprimată cu ajutorul timpului necesar pentru aglutinarea pe lamă.

3.Standarde internaţionale şi unităţi internaţionale

Au fost stabilite standardele internaţionale de către Organizaţia Mondială a Sănătăţii pentru reactivii pentru gruparea sanguină anti-A şi anti-B, şi anti-D incomplet şi sunt în studiu pentru reactivii pentru gruparea sanguină cu alte specificităţi. O preparaţie standard internaţională conţine, prin definiţie, un anumit număr de unităţi internaţionale pe mg sau ml şi această definiţie este independentă de titrele observate pe anumite globule roşii (¹).

(¹)Activitatea reactivilor de grupare sanguină pentru majoritatea particularităţilor este exprimată prin titrul aglutinării observat într-o serie de diluţii pe o suspensie de globule roşii. Titrul indică diluarea reactivului utilizat în ultimul amestec care are loc în aglutinare (vizibil la microscop).

Potenţa reactivilor pentru gruparea sanguină pentru care există etaloane internaţionale (anti-A şi anti-B, şi anti-D incomplet, la ora actuală) poate fi exprimată în unităţi internaţionale [a se vedea Bull, Wld. Hlth. Org. (OMS) 1954, 10, 937, 941-1950, 3, 30] pe baza unei titrări a unui reactiv necunoscut comparat cu preparatul standard internaţional sau cu un substandard naţional.

Standardele internaţionale de seruri de grupare sanguină sunt distribuite în flacoane conţinând ser uman deshidratat. Aduse la volumul de 1 ml, serurile anti-A şi anti-B conţin prin definiţie 256 U.I./ml. Acestea sunt furnizate gratuit de Laboratorul internaţional de standarde biologice al OMS, Statens Seruminstitut, Copenhaga.

Tabelul următor arată un exemplu de titrare comparativă a unui ser standard internaţional anti-A(S) şi a unui reactiv anti-A "necunoscut" (U) cu globule roşii A₁ şi globule roşii A₂B.

	Ser S	Reactiv U	Ser S	Reactiv U
globule A₁	1:512	1:128	256	64
globule A₂B	1:32	1:16	256	128
	titruri (observate)	titruri (observate)	unităţi (conform definiţiei)	unităţi (conform comparaţiei)

4.Stabilitatea şi data expirării

Stocat în condiţiile recomandate de producător, fiecare reactiv ar trebui să îşi păstreze calităţile necesare cel puţin un an.

Pentru reactivii în stare lichidă, data expirării indicată pe etichetă nu trebuie să depăşească un an de la data ultimului control satisfăcător al activităţii. Data expirării poate fi prelungită pe perioade de un an în urma unor noi controale.

În ceea ce priveşte reactivii în stare deshidratată, data expirării indicată pe etichetă va depinde de rezultatele probelor de stabilitate şi va trebui să fie aprobată de autorităţile naţionale de control.

5.Conservarea

Reactivii pentru gruparea sanguină pot fi păstraţi în stare lichidă sau deshidratată. Reactivii deshidrataţi trebuie să fie conservaţi într-o atmosferă de gaz inert sau sub vid într-un recipient de sticlă sigilat în aşa fel încât să nu permită pătrunderea umidităţii. Un reactiv deshidratat din nou în prezenţa anhidridei fosforice la o presiune care să nu depăşească 0,02 mm coloană de mercur în 24 de ore nu pierde mai mult de 0,5 % din greutatea sa.

Reactivii trebuie să fie preparaţi luându-se precauţiile de asepsie necesare şi trebuie să fie feriţi de orice contaminare bacteriologică. Pentru a evita proliferarea bacteriilor, autoritatea naţională competentă poate decide că trebuie să se adauge reactivului (sau oricărui solvent furnizat cu reactivii deshidrataţi) un antiseptic şi/sau un antibiotic, cu condiţia ca, în prezenţa substanţei adăugate, reactivul să corespundă întotdeauna condiţiilor de particularitate şi de activitate.

Serurile de origine umană pentru gruparea sanguină trebuie să conţină cel puţin 2,5 mg de azot proteic pe ml de ser lichid sau reconstituit.

Reactivii, fie în stare lichidă, fie după reconstituire, trebuie să fie transparenţi şi să nu conţină nici sedimente, nici gel, nici particule vizibile.

6.Culoarea

Este de preferat ca reactivii pentru gruparea sanguină destinaţi unui schimb internaţional să nu fie coloraţi artificial, cel puţin nu înainte ca un acord internaţional să accepte un sistem uniform. Orice substanţă colorantă adăugată trebuie să fie fără efect asupra reacţiilor specifice.

7.Distribuţie şi volum

Reactivii de determinare a grupelor sanguine trebuie să fie distribuiţi în aşa fel şi în astfel de volume, încât reactivul conţinut într-un recipient să fie suficient pentru executarea testelor cu globulele martori pozitive şi negative şi, în plus, a testelor cu globulele necunoscute. Volumul conţinut în fiecare recipient trebuie să fie astfel încât, dacă este cazul, să se poată face testele de activitate descrise în prezentul protocol.

8.Registrele şi eşantioanele

Laboratorul producător va trebui să înscrie în registrele sale toate etapele de producţie şi de control al reactivilor pentru gruparea sanguină. Eşantioane adecvate ale tuturor reactivilor distribuiţi trebuie conservate de către acest laborator până când este posibil ca lotul să nu mai fie folosit.

9.Clasificarea reactivilor

Reactivii care se pot utiliza pentru determinarea grupelor sanguine pot să conţină substanţe de origine umană, animală, vegetală (sau minerală), unele constituind principiul activ, altele aditivii necesari pentru întărirea activităţii lor sau păstrarea stabilităţii lor.

Din motive tehnice, aceşti reactivi au fost grupaţi în trei capitole după originea constituentului lor activ. Aceasta nu înseamnă că reactivii de origine umană conţin exclusiv produse de origine umană sau că reactivii animali sau vegetali nu pot să conţină substanţe de origine umană.

10.Etichetarea, prospectul şi certificatul

O etichetă în limbile engleză şi franceză tipărită negru pe alb va fi fixată pe fiecare recipient final şi va purta următoarele indicaţii:

1. numele şi adresa unităţii producătoare;

2. numele reactivului, aşa cum este indicat în titlul specificaţiilor corespunzătoare;

3. numele şi cantitatea antisepticului şi/sau antibioticului -dacă este cazul - sau indicarea absenţei acestuia;

4. volumul sau, dacă reactivul este deshidratat, volumul şi compoziţia lichidului necesar pentru reconstituirea sa;

5. data expirării;

6. numărul lotului.

În plus, această etichetă sau eticheta pachetului conţinând mai multe recipiente finale sau prospectul care însoţeşte recipientele va purta următoarele indicaţii:

1. numele şi adresa unităţii producătoare;

2. numele reactivului, aşa cum este indicat în titlul specificaţiilor corespunzătoare;

3. volumul sau, dacă reactivul este deshidratat, volumul şi compoziţia lichidului necesar pentru reconstituirea sa;

4. data ultimului control de activitate;

5. data expirării (dacă este cazul);

6. numărul lotului;

7. descrierea potrivită a modului de folosire preconizat de către producător;

8. condiţii de stocare a flacoanelor nedeschise şi precauţii de luat după desigilare;

9. compoziţia exactă, inclusiv (dacă este cazul) antisepticul şi/sau antibioticul;

10. indicarea prezenţei sau absenţei oricărui produs de origine umană.

Fiecare transport trebuie să fie însoţit de un certificat conform cu dispoziţiile articolului 4 din acord şi prevăzute în anexa la prezentul protocol. Exemple de etichete şi de prospect sunt anexate la prezentul protocol.